求证！采样管也会影响新冠病毒核酸检测的质量？

近期国内新冠疫情多地频发，防控形势复杂严峻。作为新冠肺炎确诊的金标准，新冠病毒核酸检测质量对于疫情防控具有重要作用。为规范新冠病毒核酸检测质量，相关部门已发布了多个文件。

但新冠病毒核酸检测假阴性和假阳性的情况还是屡有发生。这可能由多种因素导致，如样本采集不规范、样本没有按照相关要求运送和保存、检测试剂和提取试剂质量、仪器故障、人员操作、疫苗污染等。

今天和大家讨论一个很多人都忽视的分析前质量保证环节——采样管。

大家都知道做核酸检测的第一步就是样本采集。相关文件对采集人员、流程、采集方法等都做出了详细要求。但是对于采样管的要求较为简单，仅为“人群筛查应选择具有病毒灭活功能的采样管”，主要功能是灭活病毒（保证生物安全性）的同时保护病毒核酸不被降解（保证检测质量），目前各医疗机构都按要求使用此类产品。

此外，在“实验室检测”部分也要求“使用试剂盒说明书上建议的配套采样管”，但因种种原因，各医疗机构基本没有按此要求执行。

因仅需I类备案，众多厂商也抓住商机纷纷推出相关产品。据个人不完全统计，上海地区就有多达30种以上品牌。但是，不同品牌的产品成分间存在较大的差异，且所要求的运送条件也各有不同，如有些要求2-8℃，有些则声称常温能保存一周。

那这些采样管的质量是否存在差异？是否会影响检测结果呢？带着这些疑问，我们评估了一下采样管的保存效果。

本次评估共收集了在上海地区已广泛使用的11种采样管。为尽可能模拟新冠病毒，我们选择了流感病毒PR8株（具有种属特异性，仅感染小鼠）作为评估样本，因这两种病毒结构非常相似，均为包膜包裹着单链RNA（见下图）。

为克服人员操作差异，评估中所有病毒稀释操作均由同1人完成，且使用全自动核酸提取仪进行RNA提取并完成反应体系分装。为体现保存液不同条件下的保存效果，我们评估了在不同保存温度（4℃、常温25℃和37℃）下不同保存时间（0、2、4、6和24h）的保存效果。

“震惊！采样管也会影响新冠病毒核酸检测质量？”虽然上述这句话有点夸张，但这的确反映出当我看到部分评估结果时的真切感受。关于评估结果，可以简单将其分为4类：

第1类：优秀产品（★★★★★）

相比生理盐水对照组，该品牌产品在不同保存条件下的不同保存时间内，Ct值均无明显波动，甚至37℃放置24h都未出现Ct值明显变化，说明其对病毒RNA的保护效果非常好。

此类产品占比约为27.3%（3/11），比例并不高。

第2类：良好产品（★★★★）

相比生理盐水对照组，该品牌产品在6h内不同温度下对病毒RNA的保护效果都不错，但在25℃和37℃放置24h后，Ct值明显升高，说明此条件下保存效果欠佳。

此类产品占比约为36.4%（4/11），比例尚可。

第3类：合格产品（★★★）

相比生理盐水对照组，该品牌产品仅在4℃条件保存效果尚可，但随温度升高其保存效果在2h后即出现明显下降。此类产品占比约为9.1%（1/11），占比较少。

第4类：须努力产品（★）

该类产品在任一温度条件下保存效果都较差，甚至不如生理盐水对照组。如下图这款产品，加入病毒后立即检测便出现Ct值明显升高，表明其导致了病毒RNA的快速降解。更为讽刺的是，该产品说明书中声称常温下可稳定保存病毒样本1周。

此类产品占比约为27.3%（3/11），比例也不少。

以上结果表明，目前临床广泛使用的病毒采样管质量参差不齐。

考虑到大样本量检测情况下，多数医疗机构并不能保证采集样本能冷藏保存且在4h内送达实验室，因而能完全满足临床需求的采样管比例明显偏低。

而其它病毒采样管，则很可能因保存液保存效果不佳导致核酸检测假阴性（漏检）情况发生（病毒浓度较低时），特别是第4类产品，这对于疫情防控将起到极大的不利影响。

因实验室并没有时间和精力逐一对所用采样管进行评估验证，为避免发生检测假阴性情况，各医疗机构应在规范采集样本后尽快（如3h）低温（2-8℃）送检，这样至少可以保证大多数采样管的保存液不会对检测质量造成过多影响。

PS：不排除部分采样管质量问题由产品批次原因导致。

题图来源：新华社

编辑：yeah 审校：小冉